Η Ειδική Πράκτορας Avery Ryan, την οποία υποδύεται η πολυβραβευμένη ηθοποιός Patricia Arquette, είναι η επικεφαλής της Μονάδας Ηλεκτρονικού Εγκλήματος του FBI, και υπεύθυνη για την εξιχνίαση κάθε παράνομης δραστηριότητας που έχει ως έδρα τον κόσμο του διαδικτύου. . Συνεργάτες της είναι ο πράκτορας Elijah Mundo, ένας εγκληματολόγος εθισμένος στη δράση, ο Daniel Krumitz, ο εσωστρεφής αλλά πανέξυπνος ηλεκτρονικός ερευνητής, ο Brody Nelson, ο χάκερ που άφησε την παράνομη ζωή για να βοηθήσει το FBI, και η Raven Ramirez, ειδικός στα μέσα κοινωνικής δικτύωσης και τις δημόσιες σχέσεις. Βασισμένο στην επιτυχημένη συνταγή των τριών προηγούμενων CSI, το CSI:Cyber θα έπρεπε να προσφέρει κάτι το διαφορετικό από τους προκατόχους του. Έτσι λοιπόν παύει να αφορά το εγκληματολογικό εργαστήριο μιας πόλης και περνά σε ομοσπονδιακό επίπεδο, αν και η έδρα φιλοξενείται στο Κουάντικο της Βιρτζίνια. Η φύση των εγκλημάτων που εξιχνιάζει αφορά αποκλειστικά τον κυβερνοχώρο. Το darknet ή αλλιώς σκοτεινό δίκτυο, είναι το κομμάτι εκείνο του διαδικτύου στο οποίο δραστηριοποιούνται οι παράνομοι της σύγχρονης εποχής. Κυκλώματα παιδεραστίας, κατάχρηση των social media, αγοραπωλησίες όπλων και ναρκωτικών σε χώρους μη συμβατικούς πλέον, διαφορετικούς από όλα όσα ξέραμε.
The FBI’s team of Cyber Crime Investigators, headed by Special Agent Avery Ryan, works to solve cases involving the dark-net. Avery, a Special Agent in Charge and esteemed Cyber-Psychologist heads up a team, including Senior Special Agent Elijah Mundo, tasked with solving murders, cyber-theft, hacking, sex offences, and blackmail.